維生素B12免疫親和柱

檢測項目：營養成分

適用樣本：嬰幼兒配方奶粉、牛奶及含乳飲料、維生素功能飲料及碳酸飲料、果汁類

VB12，別名氰鈷胺素、抗惡性貧血維生素等，是一種重要的B族維生素，攝取不足可能引起惡性貧血、精神不振等疾病。

用途

免疫親和柱可特異性選擇吸附樣品液中的VB12，從而對基質復雜的樣品中的VB12起到針對性的凈化作用，過柱凈化后的樣品可直接用于HPLC或LC-MS分析。親和柱與HPLC或LC-MS配合使用可達到快速測定的目的，以改善信噪比，可提高檢測方法的準確度。

原理

測定的基礎是抗原與抗體反應，抗體連接在柱體內，樣品經過提取、離心、過濾，緩慢的通過VB12免疫親和柱，在免疫親和柱內VB12與抗體結合，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他雜質。用甲醇洗脫VB12，經氮氣吹干復溶后注入到分析儀器中檢測。

注意事項

1、使用前，免疫親和柱需回至室溫(22～25°C)。
2、親和柱2～8°C儲存，不得凍存。
3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
4、取樣量：根據需要可以適當增加或減少取樣量，注意提取液量要相應改變。
5、柱容量：1000ng，當樣本中待檢VB12的含量除以稀釋倍數高于柱容量時，需要適當降低上樣液的體積，重新檢測。
6、pH：親和柱的上樣溶液pH需在6～8之間，若偏離此范圍需要用鹽酸或氫氧化鈉調節pH。
7、在重力作用下過柱或用氣控操作架控制流速為1.5-2mL/min。
8、上機檢測時的溶劑與流動相一致可消除溶劑效應的影響。
9、氰化鉀有毒，操作時要穿防護服、戴長筒膠皮手套、護目鏡、口罩和帽子。氰化鉀遇酸會釋放劇毒氣體氫氰酸，反應完的廢液中可加入次氯酸鈉溶液，處理后再排放；所有接觸過的器皿、手套建議用4%次氯酸鈉浸泡處理。此溶液中可以適當加些氫氧化鈉，保證溶液的堿性環境，24小時后，用氰基檢測試紙檢查。