JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒

JC-10是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-10聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，可以產(chǎn)生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-10不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時JC-10為單體，可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。JC-10單體的最大激發(fā)波長為515nm，最大發(fā)射波長為529nm；JC-10聚合物的最大激發(fā)波長為585nm，最大發(fā)射波長為590nm。實際觀察時，使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。

使用方法

工作液配制：

1）JC-10粉末（1 mg）：直接加0.5 ml DMSO到粉末內(nèi)，室溫顛倒混勻使其充分溶解，即得到2 mg/ml（約3 mM）的儲存液。溶液分裝成小量儲存于-20℃，避光干燥，避免反復凍融。

2）JC-10儲存液（1mg in DMSO）：本品是JC-10的DMSO儲存液，濃度為2 mg/ml（約3 mM）。使用者需要根據(jù)單次用量來分裝，-20℃避光干燥，避免反復凍融。

3）工作液配制（現(xiàn)配現(xiàn)用）：將凍存的儲存液置于室溫充分融化，之后用HHBS（1×Hanks with 20 mM Hepes buffer, pH 7.0）或其他緩沖液（pH 7-8，含0.02% Pluronic® F-127）配制成10-30 μM 1×工作液。渦旋混勻。

注：對于某些細胞，在pH 8情況下可能會阻止JC-10滲透入細胞。