脫氫乙酸作為一種新型的化學(xué)防腐劑，在食品分析檢測(cè)中，對(duì)脫氫乙酸的測(cè)定幾乎是必不可少的，尤其在食品安全問(wèn)題備受關(guān)注的今天，對(duì)脫氫乙酸的準(zhǔn)確測(cè)定更顯得尤為重要。

我們都知道一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的成功與否和多種因素是分不開(kāi)，從采樣、制樣、到前處理最后上機(jī)檢測(cè)，儀器的狀況條件，環(huán)境的溫度/濕度等等一些列的條件因素都將影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。

而前處理又是重中之中，下面總結(jié)了一些有關(guān)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)提高回收率的前處理方法，快來(lái)看看和你的實(shí)驗(yàn)方法有多少區(qū)別吧。

1 確定提取溶劑

脫氫乙酸難溶于水，在弱堿性水溶液(pH 值7-8)中溶解度較大，易溶于乙醇、丙酮、乙醚等有機(jī)溶劑。分別選用乙醇、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、環(huán)己烷/ 乙酸乙酯（1:1，V/V）作為提取溶劑, 按GB/T5009.121-2003 中處理方法進(jìn)行回收率試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明石油醚提取效率較差，而乙醇、乙醚、乙酸乙酯提取效率高且相差較小。

但對(duì)于憎水的弱極性氣相色譜柱來(lái)說(shuō)，用乙醇和乙醚提取很難除去水分，而且乙醚提取物中脂肪較多，很難處理干凈；環(huán)己烷 / 乙酸乙酯比乙酸乙酯提取效率低一點(diǎn)，而且其提取共萃物也更多，因此GB 5009.121-2016中還是采用乙酸乙酯作為提取溶劑，在進(jìn)GPC 前轉(zhuǎn)換成環(huán)己烷/ 乙酸乙酯（1:1，V/V）溶劑。

2 選擇萃取方式

在GB/T 5009.121-2003 中，樣品前處理需加硫酸調(diào)節(jié)溶液成酸性，再用乙醚提取3 次，后用飽和氯化鈉、碳酸氫鈉溶液多次洗滌乙醚提取液。由于調(diào)節(jié)pH 使組分處于中性分子狀態(tài)，提取后造成乙醚提取液中或多或少含有硫酸，酸性進(jìn)樣液會(huì)造成氣相色譜柱中固定液的流失，甚至損壞色譜柱。而且乙醚提取液中含有脂肪成份較多，采用脫脂棉脫脂效果不理想，易將脂肪帶入毛細(xì)柱，使毛細(xì)柱不易清除這些高沸點(diǎn)的雜質(zhì)，從而造成污染。

而在GB/T 5009.121-2016中采用了新的提取方式依然不能有效的解決問(wèn)題。故而引入加速溶劑萃取儀(ASE)，選擇合適的溶劑、并增加溶劑的溫度（40℃～200℃）和壓力（1500psi～2000psi）來(lái)提高提取過(guò)程的效率，提高溫度使溶劑溶解待測(cè)物的容量增加，提高溶質(zhì)的溶解能力，從而提高提取效率及速度。就可在不必調(diào)節(jié)樣品溶液酸度情況下，完全萃取目標(biāo)物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明了有機(jī)溶劑用量少、快速、回收率高的優(yōu)點(diǎn)。

3 選擇合適的凈化方式

甜食樣品經(jīng)ASE 萃取，便有大量的脂類、色素、糖份等干擾物質(zhì)被提取出來(lái)，這些高分子聚集在GC 的進(jìn)樣口和分析柱上，造成色譜分離效率降低。因此，這類樣品必須進(jìn)行有效的凈化。

即使GB/T 5009.121-2016中加入了C18固相萃取柱進(jìn)行凈化，但凈化效果依然不是很理想。但用凝膠滲透色譜（GPC）對(duì)樣品進(jìn)行凈化分離時(shí)，油脂（通常分子量大于600）等大分子物質(zhì)首先流出，隨后是小分子物質(zhì)（脫氫乙酸等），而且淋洗溶劑的極性對(duì)分離的影響并不起決定作用，特別適合凈化含脂和色素的樣品。

而糖類由于流出時(shí)間與脫氫乙酸的接近，因此洗脫液還是含有部分糖類，由于存在糖類造成進(jìn)樣針進(jìn)樣時(shí)不易清洗易堵塞，因此提取液在進(jìn)GPC 前用100mL10% 氯化鈉溶液洗滌，可以達(dá)到清除糖類作用。此凈化處理效果很好，同時(shí)對(duì)色譜柱也有很好保護(hù)。下圖是未經(jīng)過(guò)GPC凈化和經(jīng)過(guò)GPC凈化的對(duì)比圖。